近年來中藥制劑的發(fā)展比較迅速，但在純中藥制劑中添加化學(xué)藥，嚴(yán)重違反了國家法規(guī)，威脅患者的健康。格列本脲又叫優(yōu)降糖，是一種降糖效果明顯的西藥，但是由于副作用也比較明顯，因此許多患者不適合服用這種口服降糖藥。尤其是在不知情的情況下服用格列本脲 更是非常危險(xiǎn)的。長期大量地服用格列本脲，zui終會(huì)造成病人的低血糖，甚至導(dǎo)致死亡。另外，誘導(dǎo)患者服藥時(shí)不需要控制飲食，也會(huì)導(dǎo)致病人死亡。因此必須建立快速、靈敏、可靠的分析檢測方法，為純中藥制劑驗(yàn)明正身。
1、液相色譜儀檢測某些中藥制劑中的格列本脲儀器與試藥
液相色譜儀；日本島津公司HPLC系統(tǒng)(包括LC一10AD泵，Rheodyne7125進(jìn)樣閥)。
格列本脲對照品(純度為99.5％)；6種純中藥降糖藥物(分別為不同廠家6個(gè)批 次：20030108，200203O2，20020601，010401，20020621和20010313)；甲醇，乙腈(色譜純)，甲酸(分析純)，水為二次重蒸水。
2、液相色譜儀檢測某些中藥制劑中的格列本脲實(shí)驗(yàn)方法
2.1 色譜條件色譜柱：ZorbaxEclipseXDB-C8柱(5μm粒徑，150×4.6mm，Agilent)；活動(dòng)相：乙腈-水-甲酸(70：30：1)；流速：O.5mL/min；柱溫：室溫；進(jìn)樣量5OμL。
2.2 質(zhì)譜條件電噴霧離子源，正離子檢測，離子源噴射電壓：4.50kV；毛細(xì)管溫度：200℃；毛細(xì)管電壓：6.25V；鞘氣流速：1.05L/min；輔助 氣流速：O.15L/min；檢測方式：一級全掃描方式、二級全掃描方式、三級全掃描方式和選擇離子監(jiān)測方式(SIM)。
2.3 格列本脲標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精密稱取一定量的對照品置容量瓶中加人活動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，使?jié)舛葹?00μg/mL。
2.4 受試溶液的配制取不同批號(hào)的被試膠囊各10粒，取出內(nèi)容物分別混勻，將相當(dāng)于1粒膠囊內(nèi)容物重量的樣品分別置10mL具塞玻璃試管中，加進(jìn)3mL甲醇，渦流2min，超聲20min，離心10min，取上清液用于分析測定。
3、液相色譜儀檢測某些中藥制劑中的格列本脲實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 格列本脲的色譜和質(zhì)譜行為采用正離子檢測方式對格列本脲對照品進(jìn)行LC／MS分析，其保存時(shí)間為6.4min；多級質(zhì)譜分析結(jié)果，在一級全掃描質(zhì)譜分析中 產(chǎn)生的準(zhǔn)分子離子[M H] 峰為m／z494，[M Na] 峰為m／z516，[2M H] 峰為m／z987，[2M Ma] 峰為m／zlO09，在二級全掃描質(zhì)譜分析中，分子中胍基左側(cè)的酰胺鍵斷裂產(chǎn)生m／z369的碎片離子，進(jìn)一步對m／z369進(jìn)行三級全掃描質(zhì)譜分析，主 要產(chǎn)生左側(cè)酰胺鍵斷裂天生的碎片離子m／z169，總結(jié)其裂解途徑，為實(shí)際樣品中化合物的鑒定提供了可靠的依據(jù)。
3.2 待測樣品的檢測結(jié)果在相同的色譜及質(zhì)譜條件下對6種純中藥制劑的甲醇提取液進(jìn)行LC／MS分析，均檢測到色譜行為與格列本脲對照品相同的化合物，而且在相 應(yīng)的一級全掃描質(zhì)譜分析中檢測到與格列本脲相同的準(zhǔn)分子離子m／z494；為進(jìn)一步確定所檢測到化合物的結(jié)構(gòu)，對其進(jìn)行多級質(zhì)譜分析，該化合物的二級及三 級全掃描質(zhì)譜與格列本脲對照品*相同，由此可以證實(shí)在6種被試中藥降糖藥物中所檢測到的化合物為化學(xué)藥格列本脲。
4、液相色譜儀檢測某些中藥制劑中的格列本脲討論
本文采 用LC／MS技術(shù)，將液相色譜的高分離能力與質(zhì)譜分析的高選擇性相結(jié)合，對純中藥制劑中非法摻進(jìn)的化學(xué)降糖藥格列本脲進(jìn)行多級質(zhì)譜分析，對其進(jìn)行了結(jié) 構(gòu)確證，增強(qiáng)了檢測結(jié)果的可信度。該法靈敏度高，選擇性強(qiáng)，對該中藥制劑的質(zhì)量控制具有現(xiàn)實(shí)意義。
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