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液相色譜儀HPLC米酒中苯乙醇
更新時(shí)間:2015-12-31   點(diǎn)擊次數(shù):2604次

1試劑和儀器

11儀器

L7000型液相色譜儀(日本日立公司,配二極管陣列檢測(cè)器

12試劑

甲醇(HPLC級(jí)-苯乙醇標(biāo)準(zhǔn)

13色譜條件

  :ultimateXBC18(46×250mm,5μm,120) ;柱溫:25°C;檢測(cè)波長(zhǎng):210nm; 動(dòng) : +=55+45; : 10ml/min;進(jìn)樣體積:20μl。

14實(shí)驗(yàn)步驟

141標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱(chēng)取β-苯乙醇標(biāo)準(zhǔn)25mg,以流動(dòng)相(甲醇+=55+45)溶解,定容至25ml容量瓶中,此溶液為10mg/ml標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。臨用前用流動(dòng)相稀釋。

142標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

用流動(dòng)相稀釋標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液成05μg/ml、10μg/ml50μg/ml、10ml50μg/ml標(biāo)準(zhǔn)系列,參照色譜條件,將色譜儀調(diào)至*狀態(tài),進(jìn)樣20μl,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

143樣品處理準(zhǔn)確移取10ml米酒樣品于50ml容量瓶中,用流動(dòng)相定容,搖勻,經(jīng)045μm濾膜過(guò)濾,進(jìn)樣20μl

2結(jié)果與討論

21流動(dòng)相條件的選擇

本文比較了甲醇與水的不同流動(dòng)相比例( +=55+45;甲醇+=50+50;甲醇+=60+40)條件下的實(shí)驗(yàn)效果,在其他色譜條件不變的情況下,當(dāng)甲醇與水的流動(dòng)相比例為5545時(shí),樣品中的被測(cè)物峰能與溶劑峰、雜質(zhì)峰達(dá)到有效分離,且峰形對(duì)稱(chēng)性好,因此,本實(shí)驗(yàn)選用甲醇+=55+45作為流動(dòng)相。

22檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

本實(shí)驗(yàn)利用二極管陣列檢測(cè)器對(duì)β-苯乙醇在190nm300nm之間進(jìn)行波長(zhǎng)掃描,β-苯乙醇在210nm處有zui大吸收波長(zhǎng),考慮到本實(shí)驗(yàn)采用甲醇作為溶劑定容處理樣品,甲醇的紫外吸收波長(zhǎng)在190nm200nm,對(duì)本實(shí)驗(yàn)干擾小,故選用有較強(qiáng)吸收的210nm作為本方法的檢測(cè)波長(zhǎng)。

23標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)、檢測(cè)限

β-苯乙醇濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),線(xiàn)      Y=57008X+1823,相 關(guān) 數(shù)r09999,表明在05μg/ml50μg/ml范圍內(nèi)呈良好線(xiàn)性關(guān)系。以3倍噪聲信號(hào)比計(jì)算zui低檢出濃度為002μg/ml

 

24準(zhǔn)確度和精密度試驗(yàn)

在米酒樣品中分別加入10μg/ml、50μg/ml、250μg/ml低、中、高三個(gè)濃度的β-苯乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液,按上述實(shí)驗(yàn)條件分別進(jìn)行6次測(cè)定,測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

、

25樣品測(cè)定

使用本方法對(duì)市場(chǎng)銷(xiāo)售米酒進(jìn)行測(cè)定,其中樣品色譜圖見(jiàn)圖3,樣品加標(biāo)色譜圖見(jiàn)圖4。

 

 

3結(jié)果

本文建立了運(yùn)用液相色譜測(cè)定米酒中β-苯乙醇的方法,流動(dòng)相為  +(55+45) ;  ultimateXBC18(46×250mm,5μm,120) ; :25°C; 1ml/min,zui適吸收波長(zhǎng)210nm。此方法具有處理簡(jiǎn)單、快速、定量準(zhǔn)確、回收率高和重復(fù)性好的特點(diǎn),能夠滿(mǎn)足樣品檢測(cè)需要。

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