一 、開(kāi)機(jī)
1) 打開(kāi)計(jì)算機(jī),登陸windows操作系統(tǒng)。
2) 打開(kāi)主機(jī)各模塊電源(從上至下),待各模塊完成自檢后,再雙擊桌面“儀器1聯(lián)機(jī)”圖標(biāo),進(jìn)入化學(xué)工作站,從“視圖”菜單中選擇“方法和運(yùn)行控制”畫(huà)面。
3) 把各流動(dòng)相放入溶劑瓶中。
4) 旋開(kāi)排氣閥(逆時(shí)針),右單擊“四元泵”圖標(biāo)出現(xiàn)快捷鍵,點(diǎn)擊“方法”選項(xiàng)進(jìn)入泵編輯畫(huà)面。將泵流量設(shè)到5ml/min,溶劑A設(shè)到100%,打開(kāi)泵,排出管線(xiàn)中的氣體2—3分鐘,直到管線(xiàn)內(nèi)由溶劑瓶到泵入口無(wú)氣泡為止,查看柱前壓力(若大于10bar,則應(yīng)更換排氣閥內(nèi)過(guò)濾白頭)。
5) 依此切換到B、C、D溶劑分別排氣。
6) 將泵的流量設(shè)到0.5ml/min,多元泵則再設(shè)定溶劑配比,如A=80%,B=20%;關(guān)閉排氣閥(順時(shí)針)。
7) 再將泵的流量設(shè)到0.8ml/min,2分鐘后將泵的流量設(shè)到1ml/min,沖洗色譜柱20—30分鐘。
8) 把緩沖液換成流動(dòng)相,待柱前壓力基本穩(wěn)定后,打開(kāi)檢測(cè)器燈,觀(guān)察基線(xiàn)情況。
二 、數(shù)據(jù)采集方法編輯
1) 編輯樣品信息:由“運(yùn)行控制”進(jìn)入“樣品信息”,設(shè)定操作者姓名,樣品數(shù)據(jù)文件名等。
2) 編輯完整方法:從“方法”菜單中選擇“編輯完整方法”項(xiàng).選中項(xiàng)單擊“確定”入下一畫(huà)面“方法注釋”,編輯好單擊“確定”進(jìn)入下一畫(huà)面“選擇進(jìn)樣源”,選中Als單擊“確定”入下一畫(huà)面“設(shè)置方法”進(jìn)行參數(shù)設(shè)定。
3) 四元泵參數(shù)設(shè)定:在“流速”處輸入流量,如1ml/min,在“溶劑”處選中B輸入80%(A=100-B-C-D),在右面注釋欄中標(biāo)明各溶劑的名稱(chēng);設(shè)置“停止時(shí)間”和“后運(yùn)行時(shí)間”,在“壓力限值”處輸入柱子的zui大耐高壓以保護(hù)柱子如:250bar,在“時(shí)間表”添加編輯梯度。
4) 進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)定:在進(jìn)樣模式中輸入進(jìn)樣量xxul。“標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)針” ——只能輸入進(jìn)樣體積此方式無(wú)洗針功能。“針清洗后進(jìn)樣” ——可以輸入進(jìn)樣體積和洗瓶位置為xx,此方式針從樣品瓶抽完樣品后會(huì)在洗瓶中洗針。
5) 進(jìn)樣器進(jìn)樣程序參數(shù)設(shè)定:選中使用進(jìn)樣程序,在“函數(shù)”中添加相應(yīng)函數(shù)即可按程序進(jìn)樣。
6) TCC檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:在“溫度”左側(cè)下面的方框內(nèi)輸入所需溫度,并選中它,右側(cè)選中“與左側(cè)相同” ——使柱溫箱的溫度左右一致。
7) VWD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:在“波長(zhǎng)”下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng),如254nm,在“峰寬(響應(yīng)時(shí)間)”下方點(diǎn)擊下拉式三角框,選擇合適的響應(yīng)時(shí)間,如>0.1min(2s),再設(shè)置“停止時(shí)間”和“后運(yùn)行時(shí)間”。
8) 儀器曲線(xiàn)設(shè)置:默認(rèn)即可。
三 、數(shù)據(jù)處理
1) 從“視圖”菜單中單擊“數(shù)據(jù)分析”進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫(huà)面
2) 從“文件”菜單選擇“調(diào)用信號(hào)”選中您的數(shù)據(jù)文件名,單擊“確定”。
3) 譜圖優(yōu)化,從“圖形”菜單中選擇“信號(hào)選項(xiàng)”從“范圍”中選擇“自動(dòng)量程”及合適的顯示時(shí)間單擊“確定”,或選擇”自定義量程”調(diào)整,反復(fù)進(jìn)行直到圖的比例合適為止。
4) 積分:從“積分”中選擇“自動(dòng)積分”,積分結(jié)果不理想,再?gòu)牟藛沃羞x“積分事件”,選項(xiàng)選擇合適的“斜率靈敏度,峰寬,zui小峰面積,zui小峰高”.從“積分”菜單中選擇“積分”選項(xiàng)則數(shù)據(jù)被積分.如積分結(jié)果不理想則修改相應(yīng)的積分參數(shù)直到滿(mǎn)意為止。單擊左邊圖標(biāo)將積分參數(shù)存入方法。
5) 校正表設(shè)計(jì):點(diǎn)擊“校正”菜單中的“校正設(shè)置”,給出各個(gè)參數(shù):點(diǎn)擊“確定”;調(diào)出建立校正表所需的譜圖并對(duì)譜圖進(jìn)行圖形優(yōu)化和積分優(yōu)化;點(diǎn)擊“校正”菜單中的“新建校正表;在“新建校正表”欄里選定“自動(dòng)設(shè)定”點(diǎn)擊“確定”;在“校正表”中給出正確的“化合物名”和“含量”;如需增加校正點(diǎn)數(shù),給出第二校正點(diǎn)的“含量”,校正表建立完成后點(diǎn)擊“確定“,點(diǎn)擊“保存圖標(biāo)”將校正表存入方法中。
6) 打印報(bào)告:從“報(bào)告”菜單中選擇“設(shè)定報(bào)告”選項(xiàng)進(jìn)入畫(huà)面:單擊“定量結(jié)果”框中“定量”右側(cè)的黑三角選中“百分比法”面積百分比其它選項(xiàng)不變單擊“確定”.從“報(bào)告”菜單中選擇“打印”則報(bào)告結(jié)果將打印到屏幕上如想輸出到打印機(jī)上則單擊“報(bào)告”底部的“打印”鈕。
四 、關(guān)機(jī)
1) 關(guān)機(jī)前,用95%水沖洗柱子和系統(tǒng)0.5—1小時(shí),流量0.5—1ml/min,再用100%有機(jī)溶劑沖0.5小時(shí),然后關(guān)泵。
2) 退出化學(xué)工作站,及其它窗口,關(guān)閉計(jì)算機(jī)(用shutdown關(guān))。
3) 關(guān)掉主機(jī)電源開(kāi)關(guān)。
五、注意事項(xiàng):
1) 氘燈是易耗品,應(yīng)zui后開(kāi)燈,不分析樣品即關(guān)燈。
2) 開(kāi)機(jī)時(shí),打開(kāi)排氣閥,100%水,泵流量5ml/min,若此時(shí)顯示壓力>10bar,則應(yīng)更換排氣閥內(nèi)玻璃料。
3) 流動(dòng)相使用前必須過(guò)濾,不要使用多日存放的蒸餾水(易長(zhǎng)菌)。
4) 流動(dòng)相使用前必須進(jìn)行脫氣處理,可用超聲波振蕩10-15min。
5) 配制90%水+10%異丙醇,以每分2—3滴的速度虹吸排出,進(jìn)行seal-wash,溶劑不能干涸。
6) 當(dāng)使用緩沖溶液時(shí),要用水沖洗手動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣口,同時(shí)搬動(dòng)進(jìn)樣閥數(shù)次,每次數(shù)毫升。